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PAGE电泳预制胶(Tris-Gly体系,15孔,4~20%)图片
产品货号:
GS4940
中文名称:
PAGE电泳预制胶(Tris-Gly体系,15孔,4~20%)
英文名称:
PreGel Tris-Glycine PAGE,15well,4~20%
产品规格:
10块
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

本制品为Tris-Glycine缓冲体系的PAGE预制胶,凝胶浓度4~20%,不含SDS,可用于变性电泳SDS-PAGE和非变性电泳Native-PAGE。预制胶将凝胶事先配制好,使用者拿来即可上样进行电泳,减去了用户自配凝胶的麻烦,节约了大量的时间。Tris-Glycine预制胶板使用玻璃板作为材质,效果完全达到并超越传统手工PAGE胶水平,条带更加清晰。更有10孔、15孔两种孔数供选择,适用各种规格样品。预制胶板创新使用玻璃板作为材质,保质期长,兼容性好,方便快捷,更高性能。




组分规格
PAGE电泳预制胶(Tris-Gly体系,15孔,4~20%)10块
说明书1份

保存:2~8℃,不可冻存,有效期2年。


预制胶尺寸8.1×7.4×0.15cm
预制胶板尺寸9.8×8.4×0.41cm
孔数15孔
缓冲体系Tris-Glycine缓冲体系
最大上样量30μL
电压180~200V
电泳时间60min
浓缩胶4%,1.4cm



货号凝胶浓度分离范围(kD)
非变性变性
GS4928GS49358%40~200
GS4929GS493610%25~150
GS4930GS493712%15~150
GS4931GS493815%10~100
GS4932GS49394~15%15~250
GS4933GS49404~20%10~200
GS4934GS49418~20%5~200



Tris-Glycine体系蛋白分离图谱
Tris-Glycine体系蛋白分离图谱


兼容电泳槽:

  • 北京六一DYCZ-25E、DYCZ-24K、DYCZ-24KS、DYCZ-24KF
  • 君意东方JY-SCZ2+
  • 天能VE180
  • Hoefer Mighty Small (SE 250/SE 260/SE 280)
  • Bio-Rad Mini-PROTEAN (II/3/Tetra System)(需按照如下方法改造)
    Bio-Rad电泳槽中绿色U型密封条两端凸起为正面。如图所示,将密封条拉出并反转,正面(凸起)朝里,重新装回电泳槽中,并把密封圈周边压实(防止发生漏液)

  • Life Technology Novex Mini-Cell (需增加特制挡板,如需挡板可联系百奥莱博技术支持申请)
备注说明:
由于百奥莱博预制胶符合大部分国产电泳槽宽度,故使用时无需增加挡板,对于Life品牌电泳槽来说相对较薄,会造成漏液情况,故我们为您提供两片2mm厚度的塑料板(需额外申请),请根据您电泳槽的实际宽度进行相应增加垫片以保证无漏液现象。
挡板使用方法:
将挡板或挡片与胶并排放进电泳槽中,将夹板卡住,向内槽中注入缓冲液,观察是否有漏液情况,如漏液情况还存在,可以再增加一片挡板,直至无漏液现象为止。


电泳缓冲液按照附录2提供的配方配置1×Runing Buffer或直接使用试剂盒提供的粉末缓冲液配置。
  • 取胶片
    沿拆封口打开小包装,小心取预制胶胶片。
  • 装胶片
    将预制胶装入兼容电泳槽中,并检漏;如使用伯乐电泳槽,详见兼容设备具体描述。
  • 拔梳子
    双手平稳缓慢地将梳子拨出。
  • 加电泳缓冲液
    取300mL 1×Runing Buffer加入电泳槽,内槽加满电泳液,外槽的电泳液最低须加到电泳槽的1/3处,最高不可漫过胶板。
  • 上样
    将蛋白样品与loading buffer按比例混合均匀,加热处理。
  • 电泳
    设置参数,开始电泳。
  • 拆胶步骤:
    • 第一步
      电泳结束后,将预制胶取出,用刀片去除—侧硅胶。
    • 第二步
      将刀片插入两玻璃板之间的缝隙中,从上向下划,直至底部,然后微微上下撬动,即可打开玻璃板。
    • 第三步
      在胶的右下角切小三角作标记,然后沿着玻璃条轻轻划—刀(防止取胶时,发生粘连使胶破碎),取胶,继续后续的染色或者转膜实验。



  • 切记不可冻存,以免发生冻裂,无法使用。
  • 如果需要蛋白条带更加清晰、平直,可降低电压,适当延长电泳时间,Tris-Glycine体系可降压至150V。
  • 电泳缓冲液不建议至复使用,由于经电泳后,缓冲液中的离子强度、缓冲能力均发生了变化,故不能确保电泳效果。
  • 上样时,枪头不要过度插入梳孔或者斜插加样,以免戳破凝胶造成漏液。
  • 电泳后的预制胶均可使用Tris-Glycine转膜液(货号:GS1561GS1576)进行转膜。需将凝胶浸泡在转膜液中10~15min,使凝胶中的缓冲液得到充分平衡,再进行转膜。
  • 如分离<10kD蛋白建议使用小分子量蛋白凝胶制备试剂盒(货号:GS4924)。



问题可能原因建议
高浓度条带样品同时出现在相邻泳道样品呈多或加到相邻条带降低上样量。如有溢出,使用缓冲液冲洗上样孔。
上样孔破损移除制孔梳时加倍小心。如上样孔破损,换用新凝胶。
凝胶变干凝胶疑似变干,可将凝胶在电泳缓冲液中浸泡—段时间,待凝胶恢复形状后上样。
蛋白分离效果不佳样品含盐量过高使用透析、超滤,或稀释等方法降低盐浓度。
电泳体系温度过高提高电泳缓冲液用量,或使用冰袋对缓冲电泳体系温度过高液降温等改善效果。
蛋白电泳溴酚蓝显示扭曲、电泳时间大幅度延长内槽缓冲液泄漏重新夹—下胶板
上样孔中有气泡或残留凝胶保存缓冲液上样前,用移液枪吸取缓冲液轻轻冲洗上样孔,将气泡吹出。
样品蛋白浓度过高使用上样缓冲液稀释蛋白样品。
凝胶安装不当,内槽漏液检查内槽密封条、垫片等附件是否安装恰当
电压设置有误,或电泳缓冲液使用不当确认凝胶安装位置,重新安装凝胶。严格按照本说明书提供配方配置电泳缓冲液。
电泳后条带模糊、变黄电泳缓冲液PH使用透析、超滤,或稀释等方法降低盐浓度。
凝胶浓度选择不当根据凝胶最佳分离范围选用不同浓度凝胶。对于小分子蛋白的分离,请选用较高分离胶浓度的预制胶产品。
蛋白量超出凝胶分离能力提高电泳缓冲液用量,或使用冰袋对缓冲液降温。
电泳时,电流显示异常,不在常规范围之内电泳液的质量、电极是否插反、内槽电泳液是否有漏液现象对于Tris-Glycine体系预制胶,电压为180 V电泳时,1块胶的电流在49 mA左右,2块胶的电流在99 mA左右,随着时间增加电流会逐步低。
湿转时,转膜效果不好凝胶浓度、转膜时间的控制、甲醇浓度的选择湿转时120V恒压转膜60~90min。可根据预制胶上残留预染marker及膜上的预染marker确定转膜效率,并对转膜条件进行适当调整。大分子蛋白尽是选择低浓度的胶。蛋白分子量100kD以上,可调整甲醇浓度为5%;10~100kD,可调整甲醇浓度为10%;10kD以下,可调整甲醇浓度为20%~30%。
电泳时泳道拖尾严重,点样孔样品滞留明显样品裂解处理不充分,Loading buffer处理不充分降低裂解前样品浓度,或增加裂解液比例,使样品充分裂解。裂解后样品先稀释,再进行loading buffer处理。
样品中含有较大颗粒杂质如细胞碎片、菌体碎片高速离心后,取上清液电泳。
电泳条带呈微笑(中间凹陷,两边突起)样品盐离子浓度或表面活性剂浓度过高。稀释样品或对样品进行透析后,再进行loading buffer处理和上样。



附录1:如何选择HEPES体系预制胶与Tris-Glycine体系预制胶
参数HEPES体系预制胶Tris-Glycine体系预制胶
跑胶时间150V,40~50min150V,75~90min;180V,60min
分离范围10~250kD蛋白5~250kD蛋白
分辨率中等
缓冲液专用缓冲液(本试剂盒配套Buffer)普通Tris-Glycine缓冲液(需另购)
盐耐受度中等


附录2:缓冲液配方
  • 1×HEPES Running Buffer:
    SDS-PAGE:50mM Tris,50mM HEPES,0.1% SDS,2mM EDTA。推荐货号:GS4892
    Native-PAGE:50mM Tris,50mM HEPES,2mM EDTA。推荐货号:GS4814
  • 1×Tris-Glycine Running Buffer:
    SDS-PAGE:25mM Tris,192mM Glycine,0.1% SDS。推荐货号:GS1559/GS1490
    Native-PAGE:25mM Tris,192mM Glycine。推荐货号:GS1497



名称货号
固体蛋白上样缓冲液GS1472
SDS-PAGE蛋白样品上样缓冲液GS4359
5×蛋白上样缓冲液(非还原)GS1558
2×蛋白上样缓冲液GS1515
5×蛋白上样缓冲液GS1516
10×Western膜转印缓冲液GS1561
10×高分子量印迹膜转印缓冲液GS1576
双色预染蛋白Marker(15~130kDa)GS1585
三色预染蛋白Marker(10~180kDa)GS1526
蓝色预染蛋白Marker(10~180kDa)GS4826
三色预染蛋白Marker(10~180kDa)GS4824
三色预染蛋白Marker(5~245kDa)GS4827
三色预染蛋白Marker(10~245kDa)GS4876
通用型蛋白染色液GS2027
高灵敏考马斯亮蓝快速染色试剂盒GS1549
中分子量蛋白Marker(14.4~97.4kDa)GS4767
中分子量蛋白Marker(14.4~116kDa)GS4769
无毒型蛋白快速染色试剂盒GS1479
蛋白快速银染试剂盒(质谱用)GS1419
低背景银染试剂盒GS1541
蛋白快速银染试剂盒GS1426
10×Tris-Glycine SDS电泳缓冲液(pH8.3)GS1559
10×Tris-Glycine非变性电泳缓冲液GS1497
Native-PAGE电泳缓冲液粉剂(HEPES体系)GS4814
1×HEPES体系SDS-PAGE电泳缓冲液粉剂GS4892

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